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電子顯微鏡和數(shù)碼顯微鏡的區(qū)別

http://www.sygxy.cn 人氣:1608 發(fā)布時(shí)間: 2023-03-29

"數(shù)碼顯微鏡"實(shí)際上是在光學(xué)顯微鏡的基礎(chǔ)上加了一個(gè)數(shù)碼成像裝置,可以將顯微鏡所成的像,在電腦屏幕上直接顯示出來(lái),其基礎(chǔ)還是光學(xué)顯微鏡,和電子顯微鏡的成像原理是由根本區(qū)別的。在這里,我們要區(qū)別分辨率和放大倍數(shù)的問(wèn)題。細(xì)微物體在放大成像時(shí),其分辨率取決于反射的光波的波長(zhǎng),波長(zhǎng)越短,分辨率越高,電子顯微鏡是利用了波長(zhǎng)比普通可見光短得多的X射線成像,當(dāng)然具備很高的分辨率,而普通“數(shù)碼顯微鏡”的放大倍數(shù)可以很大,但分辨率是無(wú)法提高的。

光學(xué)顯微鏡的分辨率與光波的波長(zhǎng)有關(guān)。對(duì)于接近和小于光波波長(zhǎng)的物體,光學(xué)顯微鏡無(wú)能為力了。電子運(yùn)動(dòng)的波長(zhǎng)比光波波長(zhǎng)短得多,可以看到更細(xì)小的物體。光學(xué)顯微鏡是由一組光學(xué)鏡頭組成的放大成像系統(tǒng),而電子顯微鏡有電子流代替可見光,由磁場(chǎng)代替透鏡,讓電子運(yùn)動(dòng)代替光子,這樣可以看到比光學(xué)系統(tǒng)能看到的更小的物體。

電子顯微鏡是以電子束為照明源,通過(guò)電子流對(duì)樣品的透射或反射及電磁透鏡的多級(jí)放大后在熒光屏上成像的大型儀器,而光學(xué)顯微鏡則是利用可見光照明,將微小物體形成放大影像的光學(xué)儀器。概括起來(lái),電子顯微鏡與光學(xué)顯微鏡主要有以下幾個(gè)方面的區(qū)別:

1、照明源不同。電鏡所用的照明源是電子槍發(fā)出的電子流,而光鏡的照明源是可見光(日光或燈光),由于電子流的波長(zhǎng)遠(yuǎn)短于光波波長(zhǎng),故電鏡的放大及分辨率顯著地高于光鏡。

2、透鏡不同。電鏡中起放大作用的物鏡是電磁透鏡(能在中央部位產(chǎn)生磁場(chǎng)的環(huán)形電磁線圈),而光鏡的物鏡則是玻璃磨制而成的光學(xué)透鏡。電鏡中的電磁透鏡共有三組,分別與光鏡中聚光鏡、物鏡和目鏡的功能相當(dāng)。

3、成像原理不同。在電鏡中,作用于被檢樣品的電子束經(jīng)電磁透鏡放大后達(dá)到熒光屏上成像或作用于感光膠片成像。其電子濃淡的差別產(chǎn)生的機(jī)理是,電子束作用于被檢樣品時(shí),入射電子與物質(zhì)的原子發(fā)生碰撞產(chǎn)生散射,由于樣品的不同部位對(duì)電子有不同的散射度,故樣品電子像以濃淡呈現(xiàn)。而光鏡中樣品的物像以亮度差呈現(xiàn),它是由被檢樣品的不同結(jié)構(gòu)吸引光線多少的不同所造成的。

4、所用標(biāo)本制備方式不同。電鏡觀察所用組織細(xì)胞標(biāo)本的制備程序較復(fù)雜,技術(shù)難度和費(fèi)用都較高,在取材、固定、脫水和包埋等環(huán)節(jié)上需要特殊的試劑和操作,還需將包埋好的組織塊放入超薄切片機(jī)切成50~100nm厚的超薄標(biāo)本片。而光鏡觀察的標(biāo)本則一般置于載玻片上,如普通組織切片標(biāo)本、細(xì)胞涂片標(biāo)本、組織壓片標(biāo)本和細(xì)胞滴片標(biāo)本等。


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